Virkningen af indol-3-laktat-tilskud i dyremodeller for multipel sklerose
Jeg starter helt fra bunden med basale færdigheder som buskmekaniker.
Der er ikke meget, jeg ikke kan gøre, hvis jeg har tid nok, men det er problemet med degenerative sygdomme.
Som du ved, er det svært at få information fra læger eller kemikalieleverandører.
Jeg vil gerne leve.
Jeg påstår ikke, at dette er af værdi, men måske kan du hjælpe mig med at forstå mere.
Det bedste, jeg har fundet indtil videre, er data på kemikalieleverandørernes hjemmesider:
Hvordan tilberedes stamopløsningen?
Vælg et passende opløsningsmiddel til at fremstille den koncentrerede stamopløsning i henhold til forsøgets krav. Oplysninger om opløselighed kan findes på produktsiden på vores hjemmeside. Til in vitro-eksperimenter bruges DMSO ofte som opløsningsmiddel.
Stamopløsningen fortyndes derefter for at lave en arbejdsopløsning (f.eks. 1:1000-fortynding i cellekulturmedium).
Her er nogle anbefalinger til opløsning af produktet:
(1) Genberegn koncentrationen af stamopløsningen i henhold til følgende formel: Faktisk koncentration (mg/mL) = Molekylvægt (g/mol) x Koncentration (mM) x 10-3
(2) Tjek, om opløsningsmidlet er blevet forurenet, f.eks. absorberer DMSO fugt.
(3) Nogle forbindelser er vanskelige at opløse på grund af deres struktur og kemiske egenskaber og kan kræve yderligere blanding såsom vortexing eller ultralydbehandling. Når det er nødvendigt, kan opvarmning af forbindelsen også hjælpe med opløsningsprocessen. Men husk ikke at opvarme forbindelsen til mere end 45 °C for at undgå at ændre produktet.
Hvordan opbevares produktet?
Opbevares ved -20 ℃ eller -80 ℃ Aliquot stamopløsning til rutinemæssige brugsvolumener og opbevares ved -20 ℃ eller -80 ℃. Undgå gentagen nedfrysning og optøning.
Hvordan forbereder man arbejdsopløsningen?
(1) Beregn den nødvendige fortynding ved hjælp af vores fortyndingsberegner.
(2) Tilsæt langsomt stamopløsningen til opløsningsmidlet, indtil den ønskede koncentration er opnået.
Bland ved vortexing eller gentagen pipettering.
(3) Hvis der er udfældning i arbejdsopløsningen, skal du lade arbejdsopløsningen stå i 10 minutter, vortexe eller pipettere og derefter kontrollere igen.
(4) Vores forbindelser er for det meste fedtopløselige. Der kan forekomme udfældning, når de fortyndes med vandige opløsningsmidler såsom cellekulturmedium eller PBS En fuldstændig opløsning kan opnås ved ultralydbehandling.
Hvad skal jeg være opmærksom på i forbindelse med cellebaserede assays?
DMSO bruges til at forberede stamopløsningen i de fleste cellebaserede assays. Stamopløsningen fortyndes i kulturmediet for at fremstille en arbejdsopløsning. Sørg for, at koncentrationen af DMSO er <=0,1 % for at undgå forgiftning af cellerne Normalt er den negative kontrol i forsøget kulturmediet med DMSO i samme koncentration.
Hvad skal jeg være opmærksom på i forbindelse med dyreforsøg?
(1) Vores forbindelser er for det meste fedtopløselige. Hvis DMSO bruges til at fremstille stamopløsningen og derefter fortyndes for at fremstille arbejdsopløsningen til dyreforsøg, er det muligvis ikke muligt at opnå de nødvendige doser. I stedet er der brug for hydrotrope midler, såsom natriumcarboxymethylcellulose (CMC-Na), Tween 80 eller glycerol.
For eksempel for at konvertere den dosis, der bruges til en mus (20m/kg), til den dosis, der bruges til en kanin på 1,5 kg:
Gruppe A Dyr: mus; Gruppe B Dyr: Kanin;
Omregningskoefficient:
0,37 Den anvendte dosis til kaninen ville være 1,5 kg*(0,37*20 mg/kg) = 11,1 mg.
