Indola 3 laktāta papildināšanas ietekme multiplās sklerozes dzīvnieku modeļos
Es sāku no nulles ar pamatprasmēm krūmu mehānikas jomā.
Nav daudz kas tāds, ko es nevarētu izdarīt, ja man pietiktu laika, bet tāda ir problēma ar deģeneratīvām slimībām.
Kā jūs zināt, ir grūti iegūt informāciju no medicīnas speciālistiem vai ķīmisko vielu piegādātājiem.
Es gribu dzīvot.
Netieku apgalvot, ka tas ir noderīgi, bet varbūt jūs varat man palīdzēt saprast vairāk.
Labākais, kas man līdz šim ir pieejams, ir atrodams ķīmisko vielu piegādātāju vietņu datos:
Kā pagatavot izejas šķīdumu?
Lūdzu, izvēlieties piemērotu šķīdinātāju, lai sagatavotu koncentrētu izejas šķīdumu atbilstoši eksperimenta prasībām. Informācija par šķīdību ir atrodama mūsu tīmekļa vietnes produkta lapā. In vitro eksperimentos kā šķīdinātāju bieži izmanto DMSO.
Pēc tam pamatšķīdumu atšķaida, lai iegūtu darba šķīdumu (piemēram, atšķaidījums 1:1000 šūnu kultūras vidē).
Šeit ir daži ieteikumi produkta šķīdināšanai:
(1) Pārrēķiniet izejas šķīduma koncentrāciju pēc šādas formulas: Faktiskā koncentrācija (mg/ml) = Molekulmasa (g/mol) x Koncentrācija (mM) x 10-3.
(2) Pārbaudiet, vai šķīdinātājs nav piesārņots, piemēram, DMSO absorbē mitrumu.
(3) Dažus savienojumus to struktūras un ķīmisko īpašību dēļ ir grūti izšķīdināt, un var būt nepieciešama papildu sajaukšana, piemēram, virpuļošana vai ultraskaņa. Vajadzības gadījumā šķīdināšanas procesā var palīdzēt arī savienojuma sildīšana. Taču atcerieties, ka nedrīkst karsēt savienojumu augstāk par 45 ℃, lai izvairītos no produkta izmainīšanas.
Kā uzglabāt produktu?
Uzglabāt -20 ℃ vai -80 ℃ Alikvotu krājuma šķīdumu ierastajā lietošanas apjomā un uzglabāt -20 ℃ vai -80 ℃ temperatūrā. Izvairīties no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas.
Kā pagatavot darba šķīdumu?
(1) Aprēķiniet nepieciešamo atšķaidījumu, izmantojot mūsu atšķaidīšanas kalkulatoru.
(2) Lēnām pievienojiet pamatšķīdumu šķīdinātājam, līdz tiek iegūta vēlamā koncentrācija.
Sajaucot ar virpināšanu vai atkārtotu pipetēšanu.
(3) Ja darba šķīdumā ir nogulsnes, ļaujiet darba šķīdumam nostāvēties 10 minūtes, samaisiet ar virpotu vai pipeti un pēc tam pārbaudiet atkārtoti.
(4) Mūsu savienojumi lielākoties šķīst taukos. Atšķaidot ar ūdens šķīdinātājiem, piemēram, šūnu kultūru barotni vai PBS, var rasties nogulsnes Pilnīgu izšķīdināšanu var panākt ar ultraskaņu.
Kam jāpievērš uzmanība, veicot uz šūnām balstītus testus?
Lielākajā daļā uz šūnām balstītu analīžu izejas šķīduma pagatavošanai izmanto DMSO. Pamatšķīdumu atšķaida barotnē, lai sagatavotu darba šķīdumu. Pārliecinieties, ka DMSO koncentrācija ir < 0,1 %, lai izvairītos no šūnu saindēšanas Parasti eksperimenta negatīvā kontrole ir barotne ar DMSO tādā pašā koncentrācijā.
Kam jāpievērš uzmanība eksperimentos ar dzīvniekiem?
(1) Mūsu savienojumi lielākoties šķīst taukos. Ja DMSO izmanto, lai pagatavotu izejas šķīdumu un pēc tam atšķaida, lai pagatavotu darba šķīdumu eksperimentiem ar dzīvniekiem, var nebūt iespējams iegūt vajadzīgās devas. Tā vietā nepieciešamas hidrotropiskas vielas, piemēram, nātrija karboksimetilceluloze (CMC-Na), Tween 80 vai glicerīns.
Piemēram, lai konvertētu pelei lietoto devu (20 m/kg) uz 1,5 kg smagam trusim lietoto devu:
A grupas dzīvnieks: pele; B grupas dzīvnieks: Trusis;
Pārrēķina koeficients:
0,37 Trusim izmantotā deva būtu 1,5 kg*(0,37*20mg/kg) =11,1 mg.
