Wpływ suplementacji 3-mleczanem indolu w zwierzęcych modelach stwardnienia rozsianego
Zaczynam od zera z podstawowymi umiejętnościami mechanika.
Nie ma wielu rzeczy, których nie mógłbym zrobić, mając wystarczająco dużo czasu, ale to jest problem z chorobą zwyrodnieniową.
Jak wiesz, trudno jest uzyskać informacje od lekarzy lub dostawców chemikaliów.
Chcę żyć.
Nie twierdzę, że to ma wartość, ale może pomożesz mi zrozumieć więcej.
Najlepsze, co do tej pory znalazłem, to dane na stronach dostawców chemikaliów:
Jak przygotować roztwór podstawowy?
Wybierz odpowiedni rozpuszczalnik do przygotowania stężonego roztworu podstawowego zgodnie z wymaganiami eksperymentu. Informacje na temat rozpuszczalności można znaleźć na stronie produktu w naszej witrynie internetowej. Do eksperymentów in vitro często stosuje się DMSO jako rozpuszczalnik.
Roztwór podstawowy jest następnie rozcieńczany w celu uzyskania roztworu roboczego (np. rozcieńczenie 1:1000 w pożywce do hodowli komórkowej).
Oto kilka zaleceń dotyczących rozpuszczania produktu:
(1) Przelicz stężenie roztworu podstawowego według następującego wzoru: Rzeczywiste stężenie (mg/mL) = Masa cząsteczkowa (g/mol) x Stężenie (mM) x 10-3
(2) Sprawdź, czy rozpuszczalnik nie został zanieczyszczony, np. DMSO pochłania wilgoć.
(3) Niektóre związki są trudne do rozpuszczenia ze względu na ich strukturę i właściwości chemiczne i mogą wymagać dodatkowego mieszania, takiego jak worteksowanie lub ultradźwięki. W razie potrzeby podgrzanie związku może również pomóc w procesie rozpuszczania. Należy jednak pamiętać, aby nie podgrzewać związku powyżej 45 ℃, aby zapobiec zmianie produktu.
Jak przechowywać produkt?
Przechowywać w temperaturze -20 ℃ lub -80 ℃ Roztwór podstawowy należy podzielić na rutynowe objętości i przechowywać w temperaturze -20 ℃ lub -80 ℃. Unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania.
Jak przygotować roztwór roboczy?
(1) Oblicz wymagane rozcieńczenie za pomocą naszego kalkulatora rozcieńczeń.
(2) Powoli dodawaj roztwór podstawowy do rozpuszczalnika, aż do uzyskania pożądanego stężenia.
Wymieszać przez worteksowanie lub wielokrotne pipetowanie.
(3) Jeśli w roztworze roboczym występuje wytrącanie, należy odstawić roztwór roboczy na 10 minut, wymieszać worteksem lub pipetą, a następnie ponownie sprawdzić.
(4) Nasze związki są w większości rozpuszczalne w tłuszczach. Wytrącanie może być obecne po rozcieńczeniu przy użyciu rozpuszczalników wodnych, takich jak pożywka do hodowli komórkowych lub PBS Całkowite rozpuszczenie można osiągnąć za pomocą ultradźwięków.
Na co należy zwrócić uwagę w przypadku testów komórkowych?
DMSO jest używany do przygotowania roztworu podstawowego w większości testów komórkowych. Roztwór podstawowy jest rozcieńczany w pożywce hodowlanej w celu przygotowania roztworu roboczego. Upewnij się, że stężenie DMSO wynosi <=0,1%, aby uniknąć zatrucia komórek Zwykle kontrolą negatywną w eksperymencie jest pożywka hodowlana z DMSO w tym samym stężeniu.
Na co powinienem zwrócić uwagę w przypadku eksperymentów na zwierzętach?
(1) Nasze związki są w większości rozpuszczalne w tłuszczach. Jeśli DMSO zostanie użyty do przygotowania roztworu podstawowego, a następnie rozcieńczony w celu przygotowania roztworu roboczego do eksperymentów na zwierzętach, może nie być możliwe uzyskanie wymaganych dawek. Zamiast tego potrzebne są środki hydrotropowe, takie jak karboksymetyloceluloza sodowa (CMC-Na), Tween 80 lub glicerol.
Na przykład, aby przeliczyć dawkę stosowaną u myszy (20 m/kg) na dawkę stosowaną u królika o wadze 1,5 kg:
Grupa A Zwierzę: mysz; Grupa B Zwierzę: Królik;
Współczynnik konwersji:
0,37 Dawka zastosowana u Królika wyniosłaby 1,5kg*(0,37*20mg/kg) =11,1mg.
