Impacto da Suplementação com Indole 3 Lactato em Modelos Animais de Esclerose Múltipla
Estou a começar do zero, com conhecimentos básicos de mecânica do mato.
Não há muito que eu não possa fazer com tempo suficiente, mas esse é o problema das doenças degenerativas.
Como sabem, é difícil obter informações da profissão médica ou dos fornecedores de produtos químicos.
Eu quero viver.
Não estou a dizer que isto seja de valor, mas talvez me possa ajudar a compreender melhor.
O melhor que tenho até agora é encontrado nos dados dos sites dos fornecedores de produtos químicos:
Como preparar a solução de reserva?
Selecione um solvente adequado para preparar a solução de reserva concentrada de acordo com os requisitos da experiência. A informação sobre a solubilidade pode ser encontrada na página do produto no nosso sítio Web. Para experiências in-vitro, o DMSO é frequentemente utilizado como solvente.
A solução de reserva é então diluída para fazer uma solução de trabalho (por exemplo, diluição 1:1000 em meio de cultura celular).
Seguem-se algumas recomendações para a dissolução do produto:
(1) Recalcular a concentração da solução-mãe de acordo com a seguinte fórmula: Concentração efectiva (mg/mL) = Peso molecular (g/mol) x Concentração (mM) x 10-3
(2) Verificar se o solvente foi contaminado, por exemplo, o DMSO absorve humidade.
(3) Alguns compostos são difíceis de dissolver devido à sua estrutura e caraterísticas químicas e podem exigir mistura adicional, como vórtex ou ultra-sons. Quando necessário, o aquecimento do composto pode também ajudar no processo de dissolução. Mas lembre-se de não aquecer o composto acima de 45 ℃ para evitar alterar o produto.
Como armazenar o produto?
Armazene a -20 ℃ ou -80 ℃ Solução de estoque de alíquota para volumes de uso de rotina e armazene a -20 ℃ ou -80 ℃. Evite congelamento e descongelamento repetidos.
Como preparar a solução de trabalho?
(1) Calcule a diluição necessária usando nossa calculadora de diluição.
(2) Adicione lentamente a solução estoque ao solvente até que a concentração desejada seja obtida.
Misturar por vórtex ou pipetagem repetida.
(3) Se houver precipitação na solução de trabalho, deixar a solução de trabalho repousar durante 10 minutos, misturar no vortex ou pipetar e voltar a verificar.
(4) Os nossos compostos são maioritariamente lipossolúveis. Pode haver precipitação quando diluídos com solventes aquosos, como o meio de cultura celular ou o PBS. A dissolução completa pode ser obtida por ultra-sons.
A que é que devo prestar atenção nos ensaios celulares?
O DMSO é utilizado para preparar a solução de reserva na maioria dos ensaios celulares. A solução de reserva é diluída no meio de cultura para preparar uma solução de trabalho. Certifique-se de que a concentração de DMSO é <=0,1% para evitar envenenar as células. Normalmente, o controlo negativo na experiência é o meio de cultura com DMSO na mesma concentração.
A que é que devo prestar atenção nas experiências com animais?
(1) Os nossos compostos são maioritariamente lipossolúveis. Se o DMSO for utilizado para preparar a solução de reserva e depois diluído para preparar a solução de trabalho para experiências em animais, pode não ser possível obter as doses necessárias. Em vez disso, são necessários agentes hidrotrópicos, tais como carboximetilcelulose de sódio (CMC-Na), Tween 80 ou glicerol.
Por exemplo, para converter a dose utilizada num rato (20 m/kg) para a dose utilizada num coelho de 1,5 kg:
Grupo A Animal: ratinho; Grupo B Animal: Coelho;
Coeficiente de conversão:
0,37 A dose utilizada no coelho seria 1,5kg*(0,37*20mg/kg) =11,1mg.
