Okej, killar! Dags att dela med mig av lite kunskap. Jag kommer att beskriva en syntes som jag gjorde för psilocin, komplett med foton. Jag använde det producerade psilocinet och utvecklade ett enkelt självhäftande plåster. För att testa genomträngningen av psilocinet i plåstret använde vi en diffusionsapparat som jag sammanfogade. Den består av flera membran, med ett 1 cm^2 plåster ovanpå en 1 cm^2 bit färsk mänsklig hud med en tjocklek på 400 um (donerad från ett kirurgiskt center för bukplastik). Under huden finns ett konstant flöde av vatten som har pH 7,4 och kroppstemperatur. Diffusionsapparaten kan samla in en fraktion på 1 ml per timme, som sedan analyseras via LC-MS. Mängden psilocin i 1mL-flaskan ger flödet (mg/tim/cm^2). Detta dikterar hur mycket psilocin som passerar per timme med en plåsterstorlek på cm^2.
Detta blir djupare, eftersom psilocin är mycket instabilt. Följande publikation, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization, går över frågan. När dimeren bildas är den inte detekterbar via HPLC-analys och ATR-FTIR vilket är konstigt. Detta ger forskningsgrupper falska positiva resultat för deras psilocinrenhet. Jag har hittat ett sätt att stabilisera psilocin i plåstret.
Hur som helst, låt oss börja! Jag gjorde varje steg själv, med hjälp av min partner som är kemiingenjör. Det här var tillbaka när jag hade en schema1 och 3 DEA-licens inte bara för forskning utan också för tillverkning.
Del I (Psilocinsyntes)
steg 1: syntes av 3-[2-(Dimetylamino)-2-oxoacetyl]-1H-indol-4-ylacetat
1a. En 2000 mL, fyrhalsad, rundbottnad kolv utrustades med en omrörare, J-Kem temperaturregulator, en 250 mL dropptratt och gummiseptum genom vilket ett positivt tryck av torrN2 infördes. Septumet avlägsnades och kolven laddades ekvivalent med 1H-indol-4-ylacetat (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekv)
och anhyd Et2O (700 mL). Kolven återförslöts med septumet och spolades med N2. Suspensionen omrördes i 10 minuter och kyldes sedan
kyldes till 0 °C i ett isvattenbad under 30 minuter.
1b. Dropptratten fylldes med en lösning av oxalylklorid (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalenter) i Et2O (60 ml). Oxalylkloridlösningen tillsattes droppvis med en hastighet som var tillräcklig för att hålla temperaturen vid eller under 5 °C, för att minimera bildandet av dimer och andra möjliga biprodukter. När tillsatsen fortskred bildades en gul uppslamning av 10 och när tillsatsen var avslutad omrördes blandningen i 4 timmar.
1c. Efter denna tid tillsattes heptan (400 mL) och blandningen omrördes i 30 minuter vid 0 °C. Det gula fasta ämne som erhölls filtrerades snabbt och sköljdes successivt med heptan (2 × 300 mL), som snabbt användes i nästa steg. . En 2,0 M lösning av dimetylamin i THF (175 mL) tillsattes droppvis i en hastighet som var tillräcklig för att hålla temperaturen under 5 °C för att minimera sidoreaktioner. Efter att
tillsatsen var fullständig tillsattes pyridin (46 ml) i THF (100 ml) droppvis och blandningen omrördes väl under 60 minuter. Heptan (600 mL) tillsattes och kolvinnehållet sugfiltrerades via enBüchner-tratt. Den filtrerade återstoden överfördes till en rundbottnad kolv och avjoniserat H2O (1000 ml) tillsattes, omrördes i 30 minuter och filtrerades via Büchner-tratten. Det benvita fasta ämnet tritu-ratades sekventiellt under 40 minuter i EtOAc (600 ml) och heptan (400 ml). Uppslamningen filtrerades via Büchner-tratten och det fasta ämnet torkades i en ugn vid 40 °C över natten för att få 6 som ett ljusgult fast ämne; utbyte: 66,1 g (81 %); mp 205-207 °C.
ATR-FTIR bekräftade syntesen av syntesen av 3-[2-(dimetylamino)-2-oxoacetyl]-1H-indol-4-ylacetat. Denna förening kan förvaras vid 4C i flera månader!
Steg 2: Syntes av psilocin
Steg 2A: En 2000 mL, fyrhalsad, rundbottnad kolv var utrustad med en överliggande omrörare, J-Kem temperaturregulator, en
250 ml dropptratt och en gummiseptum genom vilken ett positivt tryck av torr N2 infördes. Septumet avlägsnades och kolven
kolven laddades sekventiellt med 3-[2-(dimetylamino)-2-oxoacetyl]-1H-indol-4-ylacetat (6; 31,5 g, 115 mmol) och 2-CH3-THF (1000
mL). Kolven sänktes ned i ett isbad vid 0 °C och en lösning av 2,3 M LiAlH4 i 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) tillsattes genom
dropptratten på 250 ml. Dropptratten sköljdes med ytterligare 2-CH3-THF (20 mL). LiAlH4-lösningen tillsattes droppvis
i en takt som höll temperaturen under 20 °C. Efter tillsatsen avlägsnades isvattenbadet och blandningen omrördes i 30 minuter.
Den ljusgula lösningen upphettades till återflöde (80 °C) med en värmemantel och blev elfenbensfärgad efter 3 h. Ackumulering av
gula fasta partiklar observerades på sidorna av den rundbottnade kolven
Steg 2C. Värmemanteln avlägsnades och kolven fick svalna till 50 °C. Kolven kyldes återigen
kyld till 20 °C. Reaktionen släcktes genom sekventiell tillsats av 3 droppar aq 1 M NaOH och 3 droppar avjoniserat H2O. Blandningen
späddes med THF (500 mL) och omrördes i 20 min. Blandningen filtrerades via Büchner-tratt och filtratet hölls under N2.
Filterkakan omrördes snabbt med 200 mL [10% lösning av (7% ammoniak i MeOH) i CH2Cl2] och THF (500 mL). Filtratet
kombinerades sedan och koncentrerades för att ge ett grönt fast ämne. Det fasta ämnet triturerades med 1:1 EtOAc/heptan (50 mL) och filtrerades sedan via
Büchner-tratt. Det mörkgröna fasta ämnet torkades i en ugn vid 40 °C över natten för att ge torrt psilocin (7) som ett mörkgrönt fast ämne; utbyte: 20,7
g (91 %); mp 167-169 °C.
Psilocin har syntetiserats.
Del II: Utveckling av transdermalt psilocinplåster och in vitro-studie (OBSERVERA: DU KOMMER ATT SE FÄRSK MÄNSKLIG VÄTSTA, DET ÄR GROVT
Jag löser sedan upp psilocinet i en patentskyddad blandning av akrylatpolymer (i heptan), jag gjuter sedan lösningen i en släpplinje och använder en gjutkniv för att få det självhäftande skiktet till 100 um. När det har torkat applicerar jag stödskiktet och stansar ut ett plåster på 1 cm^2. Detta plåster används för in vitro-studien.
Följande foto är en ögonblicksbild av diffusionsapparaten (plåstret ovanpå huden med vatten som rinner under)
Hoppas att du tyckte om det!
Detta blir djupare, eftersom psilocin är mycket instabilt. Följande publikation, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization, går över frågan. När dimeren bildas är den inte detekterbar via HPLC-analys och ATR-FTIR vilket är konstigt. Detta ger forskningsgrupper falska positiva resultat för deras psilocinrenhet. Jag har hittat ett sätt att stabilisera psilocin i plåstret.
Hur som helst, låt oss börja! Jag gjorde varje steg själv, med hjälp av min partner som är kemiingenjör. Det här var tillbaka när jag hade en schema1 och 3 DEA-licens inte bara för forskning utan också för tillverkning.
Del I (Psilocinsyntes)
steg 1: syntes av 3-[2-(Dimetylamino)-2-oxoacetyl]-1H-indol-4-ylacetat
1a. En 2000 mL, fyrhalsad, rundbottnad kolv utrustades med en omrörare, J-Kem temperaturregulator, en 250 mL dropptratt och gummiseptum genom vilket ett positivt tryck av torrN2 infördes. Septumet avlägsnades och kolven laddades ekvivalent med 1H-indol-4-ylacetat (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekv)
och anhyd Et2O (700 mL). Kolven återförslöts med septumet och spolades med N2. Suspensionen omrördes i 10 minuter och kyldes sedan
kyldes till 0 °C i ett isvattenbad under 30 minuter.
1b. Dropptratten fylldes med en lösning av oxalylklorid (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalenter) i Et2O (60 ml). Oxalylkloridlösningen tillsattes droppvis med en hastighet som var tillräcklig för att hålla temperaturen vid eller under 5 °C, för att minimera bildandet av dimer och andra möjliga biprodukter. När tillsatsen fortskred bildades en gul uppslamning av 10 och när tillsatsen var avslutad omrördes blandningen i 4 timmar.
1c. Efter denna tid tillsattes heptan (400 mL) och blandningen omrördes i 30 minuter vid 0 °C. Det gula fasta ämne som erhölls filtrerades snabbt och sköljdes successivt med heptan (2 × 300 mL), som snabbt användes i nästa steg. . En 2,0 M lösning av dimetylamin i THF (175 mL) tillsattes droppvis i en hastighet som var tillräcklig för att hålla temperaturen under 5 °C för att minimera sidoreaktioner. Efter att
tillsatsen var fullständig tillsattes pyridin (46 ml) i THF (100 ml) droppvis och blandningen omrördes väl under 60 minuter. Heptan (600 mL) tillsattes och kolvinnehållet sugfiltrerades via enBüchner-tratt. Den filtrerade återstoden överfördes till en rundbottnad kolv och avjoniserat H2O (1000 ml) tillsattes, omrördes i 30 minuter och filtrerades via Büchner-tratten. Det benvita fasta ämnet tritu-ratades sekventiellt under 40 minuter i EtOAc (600 ml) och heptan (400 ml). Uppslamningen filtrerades via Büchner-tratten och det fasta ämnet torkades i en ugn vid 40 °C över natten för att få 6 som ett ljusgult fast ämne; utbyte: 66,1 g (81 %); mp 205-207 °C.
ATR-FTIR bekräftade syntesen av syntesen av 3-[2-(dimetylamino)-2-oxoacetyl]-1H-indol-4-ylacetat. Denna förening kan förvaras vid 4C i flera månader!
Steg 2: Syntes av psilocin
Steg 2A: En 2000 mL, fyrhalsad, rundbottnad kolv var utrustad med en överliggande omrörare, J-Kem temperaturregulator, en
250 ml dropptratt och en gummiseptum genom vilken ett positivt tryck av torr N2 infördes. Septumet avlägsnades och kolven
kolven laddades sekventiellt med 3-[2-(dimetylamino)-2-oxoacetyl]-1H-indol-4-ylacetat (6; 31,5 g, 115 mmol) och 2-CH3-THF (1000
mL). Kolven sänktes ned i ett isbad vid 0 °C och en lösning av 2,3 M LiAlH4 i 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) tillsattes genom
dropptratten på 250 ml. Dropptratten sköljdes med ytterligare 2-CH3-THF (20 mL). LiAlH4-lösningen tillsattes droppvis
i en takt som höll temperaturen under 20 °C. Efter tillsatsen avlägsnades isvattenbadet och blandningen omrördes i 30 minuter.
Den ljusgula lösningen upphettades till återflöde (80 °C) med en värmemantel och blev elfenbensfärgad efter 3 h. Ackumulering av
gula fasta partiklar observerades på sidorna av den rundbottnade kolven
Steg 2C. Värmemanteln avlägsnades och kolven fick svalna till 50 °C. Kolven kyldes återigen
kyld till 20 °C. Reaktionen släcktes genom sekventiell tillsats av 3 droppar aq 1 M NaOH och 3 droppar avjoniserat H2O. Blandningen
späddes med THF (500 mL) och omrördes i 20 min. Blandningen filtrerades via Büchner-tratt och filtratet hölls under N2.
Filterkakan omrördes snabbt med 200 mL [10% lösning av (7% ammoniak i MeOH) i CH2Cl2] och THF (500 mL). Filtratet
kombinerades sedan och koncentrerades för att ge ett grönt fast ämne. Det fasta ämnet triturerades med 1:1 EtOAc/heptan (50 mL) och filtrerades sedan via
Büchner-tratt. Det mörkgröna fasta ämnet torkades i en ugn vid 40 °C över natten för att ge torrt psilocin (7) som ett mörkgrönt fast ämne; utbyte: 20,7
g (91 %); mp 167-169 °C.
Psilocin har syntetiserats.
Del II: Utveckling av transdermalt psilocinplåster och in vitro-studie (OBSERVERA: DU KOMMER ATT SE FÄRSK MÄNSKLIG VÄTSTA, DET ÄR GROVT
Jag löser sedan upp psilocinet i en patentskyddad blandning av akrylatpolymer (i heptan), jag gjuter sedan lösningen i en släpplinje och använder en gjutkniv för att få det självhäftande skiktet till 100 um. När det har torkat applicerar jag stödskiktet och stansar ut ett plåster på 1 cm^2. Detta plåster används för in vitro-studien.
Följande foto är en ögonblicksbild av diffusionsapparaten (plåstret ovanpå huden med vatten som rinner under)
Hoppas att du tyckte om det!
